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Benzonase核酸酶(无内毒素)图片
产品货号:
MT0169
中文名称:
Benzonase核酸酶(无内毒素)
英文名称:
Benzonase Nuclease(Endotoxin free)
产品规格:
25KU|100KU|5000KU
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
Benzonase Nuclease是一种核酸内切酶,可将核酸降解成2~5个碱基的5‘单磷酸核苷酸,因其能高效降解任何形式(双链,单链,线状,环状)的DNA和RNA而没有蛋白裂解活性,又被称为“全能核酸酶”。Benzonase核酸酶能有效降低蛋白样品粘度,去除蛋白样品中核酸的污染,且无蛋白酶活性残留,核酸酶活性达1×106U/mg蛋白。Benzonase核酸酶在降低粘性的同时,也具有多种其他用途,如:减少了样品处理时间,增加了蛋白产量,离心时时沉淀和上清分离的更彻底,更便于溶液的离心(尤其是超滤);提高色谱纯化的效率等。


不同Benzonase核酸酶的用途及用量推荐:
实验类型电泳蛋白样品制备非药物蛋白生产药物蛋白生产疫苗、病毒生产细胞药物
推荐货号MT0068:科研试剂MT0068:科研试剂
MT0170:Strep II标签
MT0169:无内毒素
MT0171:无内毒素,Strep II标签
细胞数量1×106个细胞(10mg组织)1g湿重(重悬液10mL)1L发酵上清液1L培养物
最低用量125U(0.5μL)25U/mL(1μL)25U/mL(1μL)0.1U/mL(0.4μL)0.1U/mL(0.4μL)
推荐用量500U(2μL)250U/mL(10μL)250U/mL(10μL)25U/mL(100μL)5U/mL(20μL)
作用时间通常作用时间37℃在15~60min;25℃在30~120min;

注:
  • 带Strep II标签核酸酶可在消化完核酸后通过Strep Tactin XT Resin(货号:MT0180)高效去除。
  • 无内毒素的两种Benzonase核酸酶,内毒素含量<40EU/mL(按照单位换算量计算为,每1000U中含有的内毒素<0.15EU),符合FDA关于核酸污染的处理规程,可适用于药用级别的研发和生产。
  • 另外,核酸酶残留可通过我公司开发的基于荧光探针的Benzonase核酸酶残留检测试剂盒(MT0181)进行评测,15min即可完成检测,最低可检测到2ng/ml的核酸酶残留。



  • 蛋白提取时去除核酸污染:在重组蛋白纯化或组织细胞样品蛋白提取时,Benzonase核酸酶可有效降低样品粘度,利于下游操作;
  • 与细胞或细菌裂解液配合使用,去除粗提物中的核酸,降低溶液粘性,提高蛋白质产量;
  • 减少存放的外周血单细胞(PBMC)的结块现象;
  • 降解核酸,利于不可溶性蛋白复性前高质量包涵体制备;
  • 有效去除带负电荷的核酸对双向SDS-PAGE蛋白样品的影响,改善蛋白质的分离效果,增强2-DE分辨率;
  • 疫苗和病毒样品制备中DNA污染的去除。



  • 蛋白提取时去除核酸污染
  • 2D凝胶电泳
  • Western Blot
  • 生物制药
  • 疫苗生产



组分25KU100KU5000KU
Benzonase核酸酶(无内毒素,250KU/mL)100μL400μL20×1mL
说明书1份

保存:-20℃,有效期2年。


图1:分别取不同量(0、0.125、0.25、0.5、1、5、10U)的Benzonase核酸酶消化人基因组DNA10min,进行琼脂糖电泳。图2:A为未加Benzonase处理的,B为加Benzonase处理的样品进行二维电泳。如图所示,Benzonase处理的样品可显著增加二维电泳的分辨率。
图3:经RIPA裂解未经Benzonase核酸酶处理的样品,大量基因组DNA释放出来,呈鼻涕状。图4:离心后,左管为未加Bezonase核酸酶,有鼻涕状粘稠物质悬浮在管中,右管为加Bezonase核酸酶,上清为透明液体。



Benzonase核酸酶在非常广泛的条件下,都能保持很高的稳定性和消化核酸的活性,这使其能够与多种细胞裂解液,如RIPA,或含有多种离子和非离子型去污剂、还原剂的蛋白提取试剂等兼容。例如:>100mM的盐酸胍会完全抑制Benzonase活性,1mM的EDTA会部分抑制Benzonase活性,5mM的EDTA会使活性丧失90%,1mM的PMSF则不会抑制核酸酶活性。浓度<0.4%的Triton?X-100对核酸酶活性几乎无影响,<0.4%的脱氧胆酸钠使核酸酶可保持70%的活性,超过该临界值之后核酸酶活性会急剧降低,1%的浓度会使活性丧失70%;0.05%的SDS对核酸酶活性几乎无影响,而SDS浓度在0.1%~1%之间时,核酸酶在变性后活性会急剧降低,可通过增加核酸酶的量使活性得到补偿。另外,核酸酶可耐受6M尿素,当尿素达到7M时,核酸酶在变性后活性会急剧降低,亦可通过增加核酸酶的量使活性得到补偿。
条件参数最适条件可作用条件范围
Mg2+1~2mM1~10mM
pH8.0–9.26–10
温度37℃0~42℃
DTT0~100mM>100mM
β-Mercaptoethanol0~100mM>100mM
一价阳离子浓度(如Na+,K+)0~20mM0~150mM
PO43-0~10mM0~100mM



37℃,pH8.0反应条件下,在30分钟内使△A260值降低1.0(相当于完全消化37μg DNA)的酶量定义为一个活性单位。
注意:含大量蛋白、细胞壁、其它盐分的粗制品,对该酶活性有部分抑制作用,使用时需要增加酶的用量。


Benzonase核酸酶残留去除:
对于Strep II标签的Benzonase核酸酶(MT0170MT0171)可通过Strep Tactin XT Resin(MT0180)直接去除,去除率>95%;对于不带标签的Benzonase核酸酶(MT0068MT0169),可通过色谱纯化去除核酸酶,然后可通过核酸酶残留检测试剂盒(MT0181)或ELISA检测来判断去除是否成功。常见的色谱纯化方式有阳离子交换介质和阴离子交换介质,具体的Benzonase去除条件如下表:
阴离子交换介质pH样品和平衡缓冲液Benzonase核酸酶
TMAE7.050mM Tris/200mM NaClnot bound
TMAE7.050mM Tris/50mM NaClnot bound
TMAE8.050mM Tris/250mM NaClnot bound
TMAE8.0>50mM Tris/100mM NaClnot bound
TMAE9.0>50mM Tris/200mM NaClnot bound
TMAE9.050mM Tris/100mM NaClnot bound
DEAE7.050mM Tris/200mM NaClnot bound
DEAE7.050mM Tris/50mM NaClnot bound
DEAE8.050mM Tris/250mM NaClnot bound
DEAE8.0>50mM Tris/100mM NaClnot bound
DEAE9.0>50mM Tris/250mM NaClnot bound
DEAE9.050mM Tris/50mM NaClnot bound
DMAE8.0>50mM Tris/250mM NaClnot bound
DMAE8.050mM Tris/50mM NaClnot bound
阳离子交换介质pH样品和平衡缓冲液Benzonase核酸酶
SO3-6.020mM phosphate/100mM NaClbound
SO3-6.020mM phosphate/200mM NaClnot bound
SO3-5.020mM acetate/200mM NaClbound
SO3-5.0>20mM acetate/700mM NaClnot bound
SO3-4.0>20mM acetate/300mM NaClbound
SO3-4.020mM acetate/800mM NaClnot bound
C00-6.020mM phosphate/0mM NaClnot bound
C00-5.020mM acetate/40mM NaClbound
C00-5.020mM acetate/100mM NaClnot bound
C00-4.0>20mM acetate/150mM NaClpartially bound
C00-4.020mM acetate/400mM NaClnot bound

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